在现代分子生物学研究中,实时荧光定量PCR(qPCR)已成为基因表达分析、病毒检测和基因定量的重要工具。其中,One Step RT-qPCR SYBR Green Kit凭借其独特的优势,成为众多科研工作者的优先试剂盒。简化操作流程,降低污染风险One Step RT-qPCR SYBR Green Kit采用一步法反应体系,将逆转录(RT)和qPCR反应集成在同一反应管中完成。这种设计不仅简化了实验操作步骤,减少了人为误差,还有效降低了因反复开盖导致的样品污染风险。例如,传统的两步法需要分别进行逆转录和qPCR反应,操作复杂且污染风险较高,而一步法试剂盒则避免了这些问题。高灵敏度与高特异性该试剂盒使用高效的逆转录酶和热启动Taq DNA聚合酶,结合优化的反应缓冲体系,能够显著提高反应的灵敏度和特异性。其检测灵敏度可达极低浓度的RNA样本,例如在某些实验中,即使RNA浓度低至0.1 pg,也能实现精细检测。此外,试剂盒中添加了抑制非特异性扩增的组分,确保熔解曲线呈现单峰,进一步提高了检测的准确性。牛痘DNA拓扑异构酶I的反应温度为37°C。在这个温度下,酶的活性高,能够有效地进行DNA的切割和连接。Recombinant Human Necti2/CD112 (His-Avi Tag)

Taq DNA Polymerase:科研中的关键工具Taq DNA Polymerase 是一种应用于分子生物学研究中的热稳定DNA聚合酶,其独特的性能和特点使其成为PCR技术的重要工具。产品特点Taq DNA Polymerase 的特点是其出色的耐热性。该酶来源于嗜热菌Thermus aquaticus,能够在高温条件下保持活性,适催化温度为75-80℃,即使在95℃下保温半小时,仍能保留50%以上的活性。此外,Taq酶具有5'→3'聚合酶活性,能够在PCR反应中高效地合成DNA链。然而,它缺乏3'→5'校正活性,这意味着在扩增过程中可能会引入少量错误,但对于大多数常规PCR应用而言,这种特性并不影响其好的使用。Taq酶的另一个重要特性是其5'→3'外切酶活性,这一特性使其在探针法qPCR中具有独特的优势。此外,Taq酶在PCR产物的3'末端会添加一个A碱基,这使得PCR产物可以直接用于TA克隆。Recombinant Mouse SEZ6 Protein,His TagPfu DNA Polymerase具有3′-5′外切酶活性,能够在DNA扩增过程中纠正碱基错配,是Taq DNA Polymerase的6-8倍。

Taq DNA聚合酶:分子生物学的“明星酶”Taq DNA聚合酶是一种从嗜热菌Thermus aquaticus中分离得到的耐热性DNA聚合酶,因其独特的耐高温特性和高效的DNA合成能力,成为分子生物学领域不可或缺的工具。该酶在PCR(聚合酶链式反应)技术中发挥着重要作用,极大地推动了基因扩增、测序和诊断技术的发展。Taq DNA聚合酶具有5'→3'聚合酶活性和5'→3'外切酶活性,但缺乏3'→5'外切酶活性,这使得它在DNA合成过程中能够快速延伸引物,同时在PCR产物的3'端添加一个突出的A碱基,便于后续的克隆操作。此外,Taq酶的耐热性使其能够在PCR的高温变性步骤中保持稳定,从而实现高效的循环扩增。近年来,科学家们通过对Taq DNA聚合酶的改造和优化,开发出多种突变体,以满足不同的实验需求。例如,Klentaq1突变体具有更高的耐热性和保真性,适用于长片段PCR扩增。此外,Taq酶的5'外切酶活性还被用于开发新型的多重PCR检测技术,如“MeltArray”技术,实现了在单次反应中检测多个靶点。Taq DNA聚合酶的发现和应用不仅极大地简化了DNA扩增的流程,还为基因诊断、遗传病检测和个性化医疗等领域提供了强大的技术支持。
One Step RT-qPCR SYBR Green Kit:有效、便捷的RNA定量检测解决方案One Step RT-qPCR SYBR Green Kit 是一种基于SYBR Green I染料的一步法实时荧光定量PCR试剂盒,为RNA模板的定量检测而设计。该试剂盒将逆转录(RT)和qPCR反应集成在同一反应管中,简化了实验操作,降低了污染风险,同时提高了检测效率。产品特点操作简便:RT和qPCR反应在同一管中完成,无需反复开盖或移液,减少了操作步骤和污染风险。高灵敏度与特异性:采用优化的反应体系和热启动Taq DNA聚合酶,确保高效的逆转录和特异的qPCR扩增。防污染设计:部分产品包含dUTP/UDG防污染系统,可有效消除PCR产物污染。适用范围广:适用于多种RNA模板,包括总RNA、mRNA和RNA病毒等,尤其适合微量目标基因的检测。兼容性强:适用于多种qPCR仪器,如ABI、Bio-Rad、Agilent等。应用场景基因表达分析:快速定量检测特定基因的表达水平。病毒检测:适用于RNA病毒的定量检测,如流感病毒、病毒等。高通量样本分析:适合多样本的单基因检测,尤其在临床检测和大规模样本分析中表现出色。利用His标签通过亲和层析从细胞裂解物中纯化目标蛋白,然后可能通过离子交换层析、等方法进一步提纯。

产品特点50× ROX Reference Dye的主要成分是高纯度的5-ROX甘氨酸,其浓度为25 µM,以50倍浓缩的形式提供。这种染料的荧光强度在PCR过程中保持稳定,不会因扩增反应而发生变化,因此可以作为理想的内部参考信号。其激发波长为575 nm,发射波长为602 nm,与多数qPCR仪器的光学系统兼容。此外,ROX Reference Dye具有良好的化学稳定性,能够在-20℃避光保存长达2年,短期使用时可在4℃保存。这种稳定性使其在实验中能够提供一致的荧光信号,减少因试剂变质导致的实验误差。性能优势校正孔间误差:qPCR实验中,由于加样量、孔位置、试管壁厚度等因素,不同孔之间的荧光信号可能存在差异。50× ROX Reference Dye能够通过校正这些非PCR相关的变化,显著提高定量的精确度。提高数据重现性:通过使用ROX染料对数据进行归一化处理,实验人员可以在较少的重复实验中获得更精确的结果,从而节省时间和资源。适用于多种仪器:50× ROX Reference Dye兼容多种主流qPCR仪器,如ABI 5700、7000、Pfu酶能够在高温条件下保持活性,在95℃孵育1小时后,仍能保持90%以上的活性特性使其在PCR反应中表现出色。Recombinant Human Necti2/CD112 (His-Avi Tag)
Taq DNA Polymerase 能够在相对较高的温度下保持稳定,其适催化温度在75-80°C。Recombinant Human Necti2/CD112 (His-Avi Tag)
Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 是一种专为长片段PCR扩增设计的即用型预混液,含有经过配体修饰的热稳定Taq DNA聚合酶、优化的缓冲体系以及荧光染料,能够有效扩增长达25 kb的基因组片段、14 kb的cDNA片段以及40 kb的λDNA片段。产品特点该预混液融合了3'-5'校正活性因子,能够明显提高扩增产物的准确性和特异性。其优化的缓冲体系和扩增因子使其在长片段扩增中表现出色,即使对于高GC含量或复杂结构的模板,也能实现高效扩增。此外,预混液中添加的染料使得PCR产物可以直接进行电泳检测,无需额外添加上样缓冲液。应用场景Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 广泛应用于基因组学研究、复杂基因组区域的扩增以及基因克隆等领域。它特别适合填补基因组缺口、端粒到端粒(T2T)基因组组装以及长片段测序模板的制备。其3'端带A的扩增产物还可直接用于T载体克隆。总之,Ultra-Long Master Mix (2×) (With Dye) 凭借其长片段扩增能力和便捷的操作流程,为复杂基因组研究提供了高效、可靠的解决方案,是分子生物学实验室的理想选择。Recombinant Human Necti2/CD112 (His-Avi Tag)
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