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荧光染料具有独特的光学特性，能够在特定波长的激发光下发出特定波长的荧光。根据其化学结构和性质，可分为以下几类：有机荧光染料：萘酰亚胺、苯并吩嗯嗪和苯并吩噻嗪类染料：这类染料具有优异的光化学、物理特性和高的荧光量子产率，在生物领域具有广泛的应用，包括生物成像和光动力***29。罗丹明染料：具有良好的光学物理性质，自诞生以来就被广泛应用于生物技术中作为荧光标记物或用于生物分子的检测。其分子设计中具有疾病***功能（如**和细菌***）的罗丹明衍生物近年来引起了越来越多的研究关注33。氟硼荧光染料（BODIPYdyes）：是传统的有机小分子染料，具有易于改性的结构和可调节的光物理性质。经过合理设计的BODIPY能通过多种方式制备成可用于**光学成像和光学***的纳米粒子37。碳点纳米组装体：生态友好且高荧光的碳点纳米组装体因其多样化的生物应用而备受关注，尤其在对抗环境和人类健康问题方面。例如，从柿子果实中制备的高荧光氮掺杂碳点（PCDs），通过一步水热反应无需任何溶剂制备而成，具有良好的水溶性和生物相容性，可用于生物成像和***活性筛选30。荧光染料作为一种重要的科研和应用工具，近年来得到了广泛的关注和研究。山西免疫荧光荧光染料
分散荧光染料：分散荧光桃红BG染料色浆离心50min后的比吸光度仍达到78.1％，离心稳定性较好。在55℃条件下放置5d后分散荧光染料色浆的粒径有所增加，其中分散荧光桃红BG染料色浆粒径的增加率*为7.5％，染料色浆热稳定性能较好；加热处理过后分散荧光染料色浆的荧光强度有所降低11。这表明分散荧光染料的稳定性在一定时间和温度范围内能够保持较好，但随着时间的延长和条件的变化，其稳定性会逐渐下降。在动物成像中，这可能会限制成像的时间窗口，影响对动物体内动态过程的长期观察。近红外荧光染料：近红外荧光染料的稳定性差异会直接影响成像的持久性。光稳定性高的近红外荧光染料能够在较长时间内保持较强的荧光信号，为动物成像提供更持久的观察窗口。例如，Hc-BIZ的光稳定性远高于Hc-BTZ，这意味着在动物成像中，使用Hc-BIZ可能会获得更持久的成像效果，有利于对动物体内的长期监测和研究12。浙江微泡荧光染料引入 “醛功能化” 策略，以同时增强近红外荧光团的光稳定性和线粒体固定化。
化学稳定性方面的差异芳香环融合BOPHYs：具有6,5,6,6,5,6-六环稠合环的新型红色α-苯并稠合BOPHY和具有5,5,6,6,5,5-六环稠合环的β-噻吩稠合BOPHY，与母体BOPHY相比，具有很高的化学稳定性1116。这些染料通过多种表征手段，如NMR光谱、HRMS、X射线结构分析、循环伏安法和光学测量等，证实了其化学稳定性。芳环稠合导致HOMO能级显著提高，有效扩展了π共轭，赋予了这些染料独特的结构和吸引人的光物理性质，同时也提高了其化学稳定性。对称双偶氮苯红色染料：两种新型对称双偶氮苯红色染料末端带有吸电子或给电子基团，具有良好的溶解性、优异的化学和热稳定性。在溶液和固态下均具有荧光性13。这表明特定的化学结构设计可以使荧光染料具有较高的化学稳定性。
荧光染料的作用过程吸收激发光：当荧光染料暴露在特定波长的激发光下时，染料分子中的电子吸收光子的能量，从基态跃迁到激发态。这个过程非常迅速，通常在飞秒到皮秒的时间尺度内完成25。激发态的电子弛豫：处于激发态的电子不稳定，会通过各种方式释放能量，回到基态。这个过程包括内部转换和振动弛豫等。内部转换是指激发态的电子通过无辐射跃迁的方式回到能量较低的激发态，而振动弛豫则是指激发态的电子通过与周围分子的碰撞等方式，将多余的能量转化为分子的振动能，从而使电子处于激发态的比较低振动能级35。发射荧光：当激发态的电子回到基态时，会发射出荧光。荧光的波长通常比激发光的波长更长，这是因为在发射荧光的过程中，电子释放的能量一部分以热能的形式散失，导致发射的光子能量较低，波长较长。多模态融合成像动物成像技术的一个重要发展方向是多模态融合成像。
影响成像的清晰度提高图像对比度：稳定的荧光染料可以在较长时间内保持较高的荧光强度，使得目标组织与周围组织之间的对比度更高。例如，在ATP荧光纳米探针基于ZIF-90和近红外染料用于**小鼠成像的研究中，CP@ZIF-90纳米探针具有***的光稳定性和化学稳定性，在检测ATP时具有**长的发射波长（705nm）和比较大的荧光增强（32倍），能够成功用于活细胞（293T和CT26细胞）中内源性和外源性ATP水平的实时荧光成像2。相比之下，不稳定的荧光染料可能会随着时间的推移而减弱荧光强度，降低图像的对比度，使得目标组织难以清晰地显示出来。增强图像分辨率：稳定的荧光染料有助于提高成像的分辨率，使图像更加清晰地显示动物体内的细微结构。例如，在多光谱光声成像小动物中荧光染料的研究中，通过多光谱方法对目标发色团和荧光染料进行灵敏区分，以25fmol的灵敏度和150μm的空间分辨率对小动物中荧光染料的深度分辨分布进行成像5。如果荧光染料不稳定，可能会导致成像分辨率下降，无法清晰地显示动物体内的细微结构，影响对疾病的诊断和研究。通过将近红外荧光染料封装在 ZIF - 90 的孔隙中，制备了三种 ATP 响应的近红外荧光纳米探针。山西免疫荧光荧光染料
果蝇胚胎运动神经元的脂溶性荧光染料标记机制。山西免疫荧光荧光染料
优化合成方法：寻找替代溶剂合成 “Nile Red”：“Nile Red” 是一种荧光、亲脂性有机染料，用于荧光显微镜中选择性识别微塑料以及在生物研究中用于细胞内脂质的定位和定量。由于对 N,N - 二甲基甲酰胺（DMF）溶剂的使用限制，需要优化一种基于另一种溶剂的方法来合成 “Nile Red”，同时保持化合物的比较好成本。通过对不同有机溶剂的筛选，发现甲醇作为替代溶剂时，“Nile Red” 的 HPLC 产率较高。合成的 “Nile Red” 纯度为 94%，适用于荧光显微镜23。山西免疫荧光荧光染料
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