[VIP第1年] 指数:3
尿素培养基是一种用于检测和分离细菌的生化培养基，特别是那些能够产生脲酶的细菌，如某些变形杆菌和幽门螺旋杆菌。以下是尿素培养基的一些特点和配制方法：1.**配方组成**：-蛋白胨：1.0g-氯化钠：5.0g-葡萄糖：1.0g-磷酸二氢钾：2.0g-酚红：0.012g-琼脂：20.0g-蒸馏水：1000ml-40%尿素水：5ml2.**配制方法**：-将上述成分（除葡萄糖和尿素外）溶解在蒸馏水中，加热煮沸，调节pH至7.2，过滤。-121℃高压灭菌15分钟。-冷却至50-55℃，加入无菌的40%尿素水5ml，混匀。-分装试管，制成斜面备用。3.**用途**：-主要用于细菌的脲酶检测。-用于鉴定变形杆菌属和其他能够分解尿素的细菌。4.**培养条件**：-通常在36℃±1℃的条件下培养24-48小时。5.**观察指标**：-培养基中的酚红作为pH指示剂，当细菌产生的脲酶分解尿素产生氨时，培养基颜色由黄色变为红色，表示细菌具有脲酶活性。6.**保存条件**：-通常在2-8°C下保存，保质期三年。7.**注意事项**：-避免摄入、吸入、皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。尿素培养基在微生物学研究和医学诊断中有着广泛的应用，尤其是在检测和研究能够分解尿素的细菌方面。BHI培养基可用于从临床标本中进行需氧细菌的初步分离，也可用于培养单增李斯特菌、葡萄球菌等。NA+0.25%青霉素酶平板
锰盐营养琼脂（ManganeseNutrientAgar）是一种用于微生物培养的培养基，特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途：1.**成分**：通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中，硫酸锰的含量为0.0308g/L，蛋白胨为10.0g/L，牛肉粉为3.0g/L，氯化钠为5.0g/L，琼脂为15.0g/L。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.3±0.1（25℃），为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**：主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验，也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**：蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂作为培养基的凝固剂；硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，备用。需要注意的是，由于培养基中含有少量硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**：通过接种质控菌株，如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等，放置于55℃需氧培养48小时，以验证培养基的性能。改良CCD琼脂培养皿克氏双糖铁试验时间通常控制在18-24小时，以确保细菌发酵充分且不过度，避免影响判断结果。
滤膜肠球菌琼脂（FilterMembraneEnterococcusAgar）是一种用于分离和计数肠球菌的选择性培养基。它通常用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。**特点**：1.**成分**：含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮化钠和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物（TTC）等。其中，胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源，叠氮化钠作为抑菌剂抑制非肠球菌生长，TTC作为显色剂使肠球菌菌落呈现红色。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.2±0.2（25℃），为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**应用**：适用于水和污水中肠球菌的检测，也可用于食品样本中肠球菌的分离和计数。4.**配制方法**：称取培养基42g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，冷却至45-50℃时倾入无菌平皿，备用。无需高压灭菌。5.**结果观察**：肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上通常形成红色菌落，便于识别和计数。滤膜肠球菌琼脂因其高选择性和特异性，是检测水和食品样本中肠球菌污染的重要工具。
肉浸液肉汤是一种基础的微生物培养基，其主要特点和制作方法如下：1.**成分**：肉浸液肉汤主要由绞碎牛肉、氯化钠、蛋白胨和磷酸氢二钾组成，再加上一定量的蒸馏水。具体配比为：绞碎牛肉500g、氯化钠5g、蛋白胨10g、磷酸氢二钾2g、蒸馏水1000mL。2.**制作方法**：首先将绞碎的去筋膜无油脂牛肉与蒸馏水混合后放冰箱过夜，除去液面之浮油，隔水煮沸半小时，使肉渣完全凝结成块，用绒布过滤，并挤压收集全部滤液，加水补足原量。然后加入蛋白胨、氯化钠和磷酸盐，溶解后校正pH至7.4～7.6，煮沸并过滤，分装烧瓶，121℃高压灭菌30分钟。3.**用途**：肉浸液肉汤通常用于培养那些营养要求不是特别高的细菌，如溶血性链球菌及其他营养要求较高的细菌的增菌培养（GB/T4789.28－2003中4.1G）。它提供了细菌生长所需的氮源、维生素和生长因子。4.**培养特征**：在肉浸液肉汤中，细菌可以很好地生长，通常表现为肉汤混浊，这是由于细菌的代谢活动导致的。5.**储存**：肉浸液肉汤的脱水培养基应避光储存于25℃下阴凉干燥处，开过封的脱水培养基应盖紧瓶盖注意密封储存。在DCR培养基中，添加不同的植物素，如2,4-D、6-BA、KT等，可以调节植物细胞的生长和分化。
Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基是一种专门用于分离和培养弯曲杆菌属（Campylobacter）细菌的培养基，尤其是空肠弯曲杆菌（Campylobacterjejuni）和大肠弯曲杆菌（Campylobactercoli）。以下是它的一些特点：1.**无血培养基**：Karmali氏培养基是一种无血的培养基，这使得它在某些应用中比需要添加血液的培养基更为方便和经济。2.**选择性培养**：该培养基含有万古霉素（vancomycin）和两性霉素B（amphotericinB）等选择性添加剂，这些添加剂有助于抑制其他非目标微生物的生长，从而提高目标弯曲杆菌的分离率。3.**微需氧环境**：弯曲杆菌是微需氧菌，Karmali氏培养基通常在微需氧条件下使用，这有助于弯曲杆菌的生长。4.**菌落特征**：在42°C下培养42小时后，空肠弯曲杆菌菌株在这种培养基上通常产生灰色、湿润、平铺的菌落，这些特征有助于识别弯曲杆菌。5.**配方**：Karmali氏弯曲杆菌琼脂培养基的基础配方包含特殊蛋白胨、玉米淀粉、氯化钠、活性碳和血晶素（hemin），以及琼脂作为固化剂。这些成分为细菌的生长提供了必需的营养物质，并且活性碳有助于中和代谢产生的产物。6.**应用**：这种培养基被ISO委员会推荐使用，适用于从食品、动物饲料和临床样本中分离弯曲杆菌。木醋杆菌的生长和纤维素的合成对pH值有一定的要求，通常在pH 5.0至6.8之间。PCA预装培养皿
低温是降低细菌代谢的关键因素之一。常用的低温保存方法包括4℃冰箱保存、-20℃至-80℃的低温冰箱保存。NA+0.25%青霉素酶平板
改良R2A琼脂（ModifiedR2Amedium）是一种应用的低营养培养基，用于微生物的分离、计数和鉴定，特别是在水质检测中用于测定细菌总数。以下是改良R2A琼脂的一些关键特点和配制方法：1.**成分**：-酵母浸出粉-蛋白胨-酪蛋白水解物-葡萄糖-可溶性淀粉-磷酸氢二钾-无水硫酸镁-酸钠-琼脂2.**pH值**：通常调节至7.2±0.2（25℃）。3.**用途**：-主要用于纯化水中菌落总数的测定。-适用于EP（欧洲药典）、USP（美国药典）、ChP（中国药典）标准。4.**配制方法**：-称取适量的培养基粉末，加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至适宜范围。-进行高压灭菌，通常是121℃灭菌15分钟。5.**保存条件**：通常在2-8°C下保存。6.**注意事项**：-在称量和操作过程中应注意无菌操作，避免微生物污染。-使用后应立即旋紧瓶盖，防止吸潮。7.**应用**：-在微生物学研究、医学诊断、食品检测和环境保护等领域有广的应用。8.**质控结果**：质控菌株接种后于30-35℃需氧培养48-120小时，用于评估培养基的性能。改良R2A琼脂因其营养丰富、操作简便和应用广，成为实验室中常用的培养基之一。NA+0.25%青霉素酶平板
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