[VIP第1年] 指数:3
DTA培养基，也称为葡萄糖胰蛋白胨琼脂，是一种用于分离培养嗜热菌芽孢的培养基。以下是它的一些主要特点：1.**用途**：DTA培养基主要用于乳制品中嗜热需氧芽孢菌计数，以及嗜热菌芽孢（包括需氧芽孢总数、平酸芽孢和厌氧芽孢）的分离培养。2.**成分**：其配方包含胰酪蛋白胨、葡萄糖、琼脂和溴甲酚紫。具体成分为每升培养基中包含胰酪蛋白胨10.0克、葡萄糖5.0克、琼脂15.0克和溴甲酚紫0.04克。3.**pH值**：DTA培养基的pH值通常调节在6.7±0.1（25℃）。4.**检验原理**：胰酪蛋白胨提供碳氮源、维生素和生长因子；葡萄糖作为可发酵的糖，溴甲酚紫作为酸碱指示剂；琼脂作为凝固剂。5.**用法**：称取DTA培养基30.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，备用。6.**生长特征**：嗜热脂肪芽孢杆菌在DTA培养基上的生长特征为黄色菌落。7.**质量控制**：进行微生物灵敏度试验时，按标签用法制备培养基，接种质控菌株，放置55℃需氧培养48小时。回收率计算时，用TSA琼脂做对照培养基。8.**储存条件**：DTA培养基应贮存于避光、干燥处，用后立即旋紧瓶盖；贮存期三年。在冷冻保存过程中，使用保护剂如甘油、血清、糖类等，可以防止因冷冻或水分不断升华对细胞的损害 。碱性琼脂平板
锰盐营养琼脂（ManganeseNutrientAgar）是一种用于微生物培养的培养基，特别适用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验。以下是它的一些主要特点和用途：1.**成分**：通常包含硫酸锰、蛋白胨、牛肉粉、氯化钠和琼脂。其中，硫酸锰的含量为0.0308g/L，蛋白胨为10.0g/L，牛肉粉为3.0g/L，氯化钠为5.0g/L，琼脂为15.0g/L。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.3±0.1（25℃），为微生物提供适宜的生长环境。3.**用途**：主要用于嗜热需氧芽孢杆菌的检验，也可用于芽孢杆菌或梭菌的培养和孢子的形成。4.**检验原理**：蛋白胨和牛肉粉提供碳氮源、维生素和生长因子；氯化钠维持均衡的渗透压；琼脂作为培养基的凝固剂；硫酸锰可促进芽孢的生成。5.**使用方法**：称取本品33.0g，加热溶解于1000ml蒸馏水中，121℃高压灭菌15分钟，备用。需要注意的是，由于培养基中含有少量硫酸锰，灭菌后可能出现微量沉淀。6.**质量控制**：通过接种质控菌株，如短小芽孢杆菌CMCC(B)63202、枯草芽孢杆菌黑色变种ATCC9372等，放置于55℃需氧培养48小时，以验证培养基的性能。Brewer厌氧菌琼脂预装培养皿哥伦比亚肉汤的pH值通常控制在7.3至7.5之间，为微生物生长提供适宜的酸碱环境 。
滤膜肠球菌琼脂（FilterMembraneEnterococcusAgar）是一种用于分离和计数肠球菌的选择性培养基。它通常用于水或其他样品中肠球菌的滤膜法分离或计数。**特点**：1.**成分**：含有胰蛋白胨、酵母浸粉、葡萄糖、磷酸氢二钾、叠氮化钠和2,3,5-三苯基四氮唑氯化物（TTC）等。其中，胰蛋白胨、葡萄糖和酵母浸粉提供碳源和氮源，叠氮化钠作为抑菌剂抑制非肠球菌生长，TTC作为显色剂使肠球菌菌落呈现红色。2.**pH值**：培养基的pH值控制在7.2±0.2（25℃），为肠球菌提供适宜的生长环境。3.**应用**：适用于水和污水中肠球菌的检测，也可用于食品样本中肠球菌的分离和计数。4.**配制方法**：称取培养基42g，加热溶解于1000mL蒸馏水中，冷却至45-50℃时倾入无菌平皿，备用。无需高压灭菌。5.**结果观察**：肠球菌在滤膜肠球菌琼脂上通常形成红色菌落，便于识别和计数。滤膜肠球菌琼脂因其高选择性和特异性，是检测水和食品样本中肠球菌污染的重要工具。
营养琼脂方瓶（罗氏瓶）通常是指营养琼脂培养基的一种包装形式，适合实验室进行微生物培养使用。营养琼脂是一种基础培养基，用于非苛养微生物的培养，以及在生化或血清学测试前的质量控制和纯度检查。以下是营养琼脂的典型配方：1.**成分**：-蛋白胨：10.0g/L-牛肉膏粉：3.0g/L-氯化钠：5.0g/L-琼脂：15.0g/L-终pH值：7.3±0.2（25℃）2.**配制方法**：-称取33g营养琼脂培养基粉末，加入1000mL蒸馏水或去离子水。-搅拌加热煮沸至完全溶解。-分装到方瓶（罗氏瓶）中，通常分装量为100mL或500mL。-121℃高压灭菌15分钟。3.**使用方法**：-灭菌完成后，取出方瓶并冷却至大约40-45°C。-如果需要富集，可在灭菌后加入血液或其他生物液体。-在无菌条件下，将培养基倒入无菌的培养皿中或作为液体培养基使用。-培养基凝固后，可将培养皿放置在热空气烤箱中，用较低温度烘烤几分钟，以去除使用前培养皿上的任何水分。4.**储存方法**：-粉末形式的培养基应储存在10至30°C之间，容器需紧密封闭。-制备好的培养基应在20-30°C的环境中储存。长双歧杆菌和婴儿双歧杆菌在PYG培养基上的生长情况通常表现为圆形凸起，奶油色，边缘整齐光滑的菌落 。
使用TCBS琼脂进行细菌分离实验的步骤如下：1.**准备工作**：-确保实验室无菌操作条件，穿戴适当的实验服和手套。-准备无菌的接种环、涂布器、无菌吸管和移液器等工具。2.**配制培养基**：-按照培养基包装上的说明，称取适量的TCBS琼脂粉末。-将称取的TCBS琼脂粉末加入到适量的蒸馏水中，通常为100mL。-将混合物加热至沸腾，以确保琼脂完全溶解。3.**冷却和倾注平板**：-将溶解好的培养基冷却至50℃左右（避免过热，以免杀死细菌），此时琼脂应该仍然是液体状态。-将冷却的培养基倒入无菌的培养皿中，一般倾注量为15-20mL/平皿。-等待琼脂凝固，形成固体培养基平板。4.**接种样品**：-使用无菌操作，将待检测的样品涂布或划线接种到TCBS琼脂平板上。-可以使用稀释涂布法、螺旋接种法或其他适当的接种方法。5.**培养**：-将接种后的平板倒置，放入恒温培养箱中。-根据实验要求，通常在36±1℃下培养18-24小时。6.**观察和选择菌落**：-培养结束后，观察平板上的生长情况，记录不同类型菌落的特征。-选择性地挑选出特定的菌落，如蓝绿色或黄色菌落，这些可能是目标弧菌。
海藻糖-脯氨酸培养基被推荐用于稀有放线菌的分离培养基，因为它有助于提高稀有放线菌的出菌率 。碱性琼脂平板
Leeming-Notman培养基（LN培养基）是一种用于培养马拉色菌属（Malassezia）的培养基。该培养基的配方包含多种营养成分，能够促进马拉色菌的生长。以下是Leeming-Notman培养基的一些关键特点和配制方法：1.**配方组成**：-蛋白胨（Bacteriologicalpeptone）：10.0g-葡萄糖（Glucose）：10.0g-酵母膏粉（Yeastextract）：2.0g-牛胆盐（Oxbile,desiccated）：8.0g-单硬脂酸甘油酯（Glycerolmonostearate）：0.5g-吐温60（Tween60）：5.0mL-橄榄油（Oliveoil）：20mL-琼脂（Agar）：15g-去离子水（Deionizedwater）：1.0L-pH值调整至5.6±0.2（25℃）2.**配制方法**：-称取培养基粉末，加入到蒸馏水或去离子水中。-加热煮沸以帮助成分溶解。-调节pH值至指定范围。-进行高压灭菌，通常是121℃灭菌15分钟。-冷却至50-55℃后，无菌加入添加剂。3.**用途**：-主要用于培养马拉色菌属的菌，这些菌与人类皮肤有共生关系，并且在医学研究中具有重要意义。4.**保存条件**：-通常在2-8°C下保存，保质期通常为两年。5.**注意事项**：-避免吸入和皮肤接触。-配制过程中应在无菌条件下操作。
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